目的:对先天性心脏病(先心病)患儿进行TBX20基因突变研究,探讨TBX20基因与先心病发生机制之间的关系.方法:对203例中国汉族先心病患儿(病例组)进行TBX20基因编码区测序,同期300例门诊体检健康儿童为对照组,检测可能的先心病相关性基因突变.对新发现的突变应用蛋白质结构预测服务器I-TASSER进行同源建模,对TBX20基因野生型及突变后的蛋白质结构模型进行预测分析.并进一步构建TBX20野生型及突变型表达载体,分别转染到COS7细胞中,通过双荧光素酶报告基因检测它们在NKX2.5、GATA4协同作用下对下游靶基因心钠素(ANF)启动子转录激活作用的影响.结果:(1)病例组1例房间隔缺损患儿发现一个新的TBX20基因错义突变c.187G>A(A63T),DNA序列中第187位鸟嘌呤突变为腺嘌呤,导致氨基酸序列中第63位丙氨酸变为苏氨酸,在对照组中均未发现该变异.(2)对错义突变A63T进一步研究中,TBX20同源建模显示第63位的非极性、疏水性丙氨酸变为极性、亲水性的苏氨酸,与Gly65、Gly68间的氢键断裂,与Asp62、His64形成新的氢键,导致蛋白质构象发生变化.(3)体外细胞实验双荧光素酶报告基因检测结果显示A63T突变型TBX20对下游靶基因ANF启动子的激活作用较野生型增强(P<0.01).结论:新发现的TBX20基因错义突变A63T导致蛋白质空间构象发生改变,可
作者：金艳梅；刘彩霞；秦珍珍；文云红；李青
来源：中国循环杂志 2022 年 37卷 6期
