目的：研究再灌注损伤挽救激酶( reperfusion injury salvage kinase,RISK)信号通路在1-磷酸鞘氨醇( sphingosine-1-phosphate,S1P)后适应减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法将H9 c2细胞随机分为7组,即(1)正常对照组(C)；(2)缺氧/复氧组(H/R)；(3)S1P组；(4)S1P+LY294002组(S1P+LY)；(5) LY 组；(6) S1P +PD98059组(S1P+PD)；(7)PD组。采用MTT法测定各组细胞存活率；比色法测定丙二醛( MDA )含量、总超氧化物歧化酶( T-SOD)和锰超氧化物歧化酶( Mn-SOD)活力；采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子浓度变化；流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率；Western blot法测定Akt和ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果与H/R组比较, S1 P组可明显增加H9 c2细胞缺氧/复氧损伤后细胞存活率及凋亡率,增加 T-SOD及Mn-SOD活力,降低MDA含量,降低钙离子浓度,增加Akt和ERK1/2磷酸化水平,而PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002或ERK1/2阻断剂 PD98059可阻断 S1P对 H9c2的上述作用。结论 S1 P能够减轻H9 c2细胞缺氧/复氧损伤,加入 PI3K/Akt 抑制剂 LY294002和 ERK1/2抑制剂PD98059均使S1P 的保护作用被取消,表明S1P通过RISK信号通路发挥抗H9 c2细胞缺氧/复氧损伤作用。

作者：王雨晴；吴艳娜；李欣；尹永强；康毅；娄建石；温克

来源：中国药理学通报 2015 年 2期