目的:研究藜芦碱对人肝癌HepG2的细胞毒作用及其诱导细胞凋亡的机制,为开发安全有效的临床用药提供依据。方法藜芦碱0.1~0.6 g·L-1作用于HepG2细胞24 h,CCK-8法检测细胞存活率并计算IC50值;藜芦碱0.1~0.5 g·L-1作用于HepG2细胞24 h,观察细胞形态变化,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞膜损伤;流式细胞仪检测活性氧(ROS)的生成量、线粒体膜电位的变化以及细胞凋亡的变化;实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因p53、Bax、细胞色素c、胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3 mRNA表达。结果藜芦碱0.1~0.6 g·L-1作用于HepG2细胞可以显著抑制细胞活性(P<0.05,P<0.01),IC50值为0.4 g·L-1,95%的可信限为0.2558~0.6965 g·L-1。藜芦碱0.1,0.2,0.3,0.4和0.5 g·L-1给药组,与正常对照组相比,LDH释放量显著升高(P<0.05,P<0.01),ROS 的生成量显著增大(P<0.05,P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05,P<0.01)。实时荧光定量PCR检测显示,凋亡相关基因p53、Bax、细胞色素c、胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论藜芦碱具有潜在的细胞毒性,能抑制HepG2细胞增殖,损伤细胞膜和线粒体进而
作者:刘苍龙;王宇光;马增春;梁乾德;肖成荣;谭洪玲;汤响林;高月
来源:中国药理学与毒理学杂志 2014 年 3期