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[目的]研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的siRNA诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的分子机制.[方法]化学合成的靶向hTERT的siRNA以脂质体法转染PC3细胞;应用寡核苷酸芯片技术分析细胞凋亡相关基因的转录谱变化;应用Western blot检测细胞中hTERT、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、凋亡抑制基因Bcl-2和胞浆Cyt c的蛋白水平变化;流式细胞术分析细胞凋亡率变化;比色法测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性改变.[结果]靶向hTERT的siRNA能有效抑制hTERT基因表达:转染hTERT-siRNA 48h后可引起TRAIL 的表达上调,Bcl-2表达下调,Cyt c释放增加,Caspase-3活性增强,细胞凋亡率升高.[结论]靶向hTERT的小干扰RNA通过活化线粒体信号传导途径诱导PC3细胞凋亡.

作者:王建;何志巍

来源:中国肿瘤 2012 年 21卷 3期

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作者:
王建;何志巍
来源:
中国肿瘤 2012 年 21卷 3期
标签:
端粒酶逆转录酶 RNA干扰 凋亡 前列腺癌
[目的]研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的siRNA诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的分子机制.[方法]化学合成的靶向hTERT的siRNA以脂质体法转染PC3细胞;应用寡核苷酸芯片技术分析细胞凋亡相关基因的转录谱变化;应用Western blot检测细胞中hTERT、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、凋亡抑制基因Bcl-2和胞浆Cyt c的蛋白水平变化;流式细胞术分析细胞凋亡率变化;比色法测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性改变.[结果]靶向hTERT的siRNA能有效抑制hTERT基因表达:转染hTERT-siRNA 48h后可引起TRAIL 的表达上调,Bcl-2表达下调,Cyt c释放增加,Caspase-3活性增强,细胞凋亡率升高.[结论]靶向hTERT的小干扰RNA通过活化线粒体信号传导途径诱导PC3细胞凋亡.