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目的 研究低剂量顺铂和低浓度天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)联合作用抑制喉癌细胞(Hep-2细胞株和AMC-HN-8细胞株)增殖的作用及其机制.方法 设立不同的实验组,包括低浓度顺铂组(3 μg/ml)、高浓度顺铂组(10 μg/ml)、TCS组(5μg/ml)、TCS和顺铂联合作用组(5μg/mlTCS和3μg/ml顺铂)和阴性对照组;连续5d使用细胞增殖检测法(cell counting kit-8,CCK-8)和乳酸脱氢酶法检测不同实验组对喉癌细胞的抑制作用和细胞毒性;流式细胞仪和Hochest33258染色观察细胞凋亡;Western blot检测C-Jun氨基端激酶(JNK),磷酸化JNK、核因子κB (nuclear factor κB,NF-κB)、p38、磷酸化p38、κB抑制蛋白(inhibitor of κB,I-κB)及磷酸化I-κB的变化.结果 与TCS和低剂量顺铂单独作用相比,TCS和顺铂联合作用可明显抑制喉癌细胞的生长(P值均<0.01),凋亡细胞数量增加;联合作用组的抑制效果与高浓度顺铂组差异无统计学意义,细胞毒性同TCS和顺铂单独作用相比差异无统计学意义(P>0.05),而毒性低于高浓度顺铂组(P<0.01);Westem blot显示顺铂增强NF-κB转录因子活性,抑制JNK信号通路,TCS组主要激活JNK信号通路而抑制NF-κB,TCS和顺铂联合作用后磷酸化JNK保持高水平抑制NF-κB活性.结论 TCS通过激活JNK信号通路,同时抑制NF-κB

作者:张铎;路丽明;陈斌;李青;周健;陶磊

来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 4期

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作者:
张铎;路丽明;陈斌;李青;周健;陶磊
来源:
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 4期
标签:
天花粉素 顺铂 JNK丝裂原活化蛋白激酶 NF-κB 喉肿瘤 细胞凋亡 Trichosanthin Cisplatin JNK mitogen-activated protein kinases NF-kappa B Laryngeal neoplasms Apoptosis
目的 研究低剂量顺铂和低浓度天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)联合作用抑制喉癌细胞(Hep-2细胞株和AMC-HN-8细胞株)增殖的作用及其机制.方法 设立不同的实验组,包括低浓度顺铂组(3 μg/ml)、高浓度顺铂组(10 μg/ml)、TCS组(5μg/ml)、TCS和顺铂联合作用组(5μg/mlTCS和3μg/ml顺铂)和阴性对照组;连续5d使用细胞增殖检测法(cell counting kit-8,CCK-8)和乳酸脱氢酶法检测不同实验组对喉癌细胞的抑制作用和细胞毒性;流式细胞仪和Hochest33258染色观察细胞凋亡;Western blot检测C-Jun氨基端激酶(JNK),磷酸化JNK、核因子κB (nuclear factor κB,NF-κB)、p38、磷酸化p38、κB抑制蛋白(inhibitor of κB,I-κB)及磷酸化I-κB的变化.结果 与TCS和低剂量顺铂单独作用相比,TCS和顺铂联合作用可明显抑制喉癌细胞的生长(P值均<0.01),凋亡细胞数量增加;联合作用组的抑制效果与高浓度顺铂组差异无统计学意义,细胞毒性同TCS和顺铂单独作用相比差异无统计学意义(P>0.05),而毒性低于高浓度顺铂组(P<0.01);Westem blot显示顺铂增强NF-κB转录因子活性,抑制JNK信号通路,TCS组主要激活JNK信号通路而抑制NF-κB,TCS和顺铂联合作用后磷酸化JNK保持高水平抑制NF-κB活性.结论 TCS通过激活JNK信号通路,同时抑制NF-κB