目的 探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂1 400W减轻人肝内胆管上皮细胞缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 对数生长期的人肝内胆管上皮细胞(HIBEC)以合适的密度接种于培养板中,将细胞分为3组:对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血再灌注+1 400W组(I/R+1 400W组).C组正常培养,I/R组和I/R+1 400W组细胞置于三气培养箱中12h模拟缺血,然后再正常培养6h模拟再灌注;I/R+1 400W组于缺血缺氧前加入终浓度为100μmol/L的1 400W.再灌注结束后收集细胞及培养液,采用CCK-8法检测细胞活力,微板法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平,Western blot法测定内质网应激(ERS)相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶12(Caspase-12)、葡萄糖调节蛋白78 (glucose regulated protein,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平.结果 与C组细胞相比,I/R组和I/R+1 400W组细胞活力显著降低(53.8±2.3)％和(66.5±2.8)％,(P＜0.05),细胞培养液LDH显著升高(287.4±9.0)U/L和(212.0±8.3)U/L(P＜0.05),细胞凋亡水平显著升高(27.5±2.3)％和(18.3±1.8)％(P＜0.05),Caspase-12、GRP78、CHOP和iNOS的表达升高(P＜0

作者：余起文；唐红卫；杨东菁；郭文治；李捷；张水军

来源：中华器官移植杂志 2019 年 40卷 4期