目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)对大鼠缺氧心肌细胞保护作用的机制. 方法 取1～3d龄SD大鼠乳鼠,分离培养心肌细胞,用于以下实验.(1)取细胞,按随机数字表法(分组方法下同)分为TRAP1组和对照组,提取细胞总蛋白.TRAP1组细胞总蛋白加入小鼠抗大鼠TRAP1单克隆一抗,对照组细胞总蛋白加入小鼠来源的同型IgG,免疫共沉淀法和蛋白质谱分析检测TRAP1可能作用的蛋白.(2)取细胞,分为常氧空白对照组、常氧+TRAP1干扰对照组、常氧+TRAP1干扰组、常氧+TRAP1过表达对照组、常氧+TRAP1过表达组,每组1孔.常氧空白对照组细胞常规培养,后4组细胞分别加入TRAP1RNA干扰空病毒载体、TRAP1 RNA干扰腺病毒载体、TRAP1过表达空病毒载体、TRAP1过表达腺病毒载体.另取细胞,分为常氧空白对照组、缺氧空白对照组、缺氧+ TRAP1干扰对照组、缺氧+TRAP1干扰组、缺氧+TRAP1过表达对照组、缺氧+TRAP1过表达组,每组1孔.各缺氧组细胞同前对应的常氧组细胞处理后,缺氧6h.实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞中细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(COX Ⅱ)mRNA表达.本实验重复3次.(3)取细胞,分为常氧空白对照组、缺氧空白对照组、缺氧+ TRAP1过表达对照组、缺氧+TRAP1过表达组、缺氧+TRAP1过表达+COX Ⅱ干扰对照组、缺氧+TRAP1过表达+COX Ⅱ干扰组,每组
作者：向飞；张东霞；马思远；黄跃生
来源：中华烧伤杂志 2016 年 32卷 12期
