目的 采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α (HIF-1α)对人膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响.方法 体外培养BIU-87细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测低氧(90%氮气+5%氢气+5%二氧化碳)和常氧下及HIF-1α-siRNA转染前后BIU-87中HIF-1α、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测HIF-1α-siRNA转染后的细胞增殖水平,细胞划痕和Transwell试验检测迁移和侵袭能力.结果 低氧8、24h条件下,HIF-1α蛋白(0.56 ±0.08、1.33 ±0.21)、MMP-2 mRNA(1.85±0.21、2.94±0.29)、MMP-2蛋白(0.68 ±0.11、1.37 ±0.22)、MMP-9 mRNA(2.08±0.32、3.49±0.44)、MMP-9蛋白(0.89 ±0.12、1.40±0.23)表达与正常氧条件比较HIF-1α蛋白(0.33±0.05)、MMP-2 mRNA(0.95 ±0.13)、MMP-2蛋白(0.47±0.07)、MMP-9 mRNA(1.21±0.17)、MMP-9蛋白(0.58±0.14)表达均显著升高(均P<0.05),HIF-1α mRNA(1.05 ±0.09、0.96 ±0.11)与正常氧条件(1.16±0.13)比较无明显变化;HIF-1α-siRNA转染后与转染前比较能有效沉默HIF-1α;与转染前(1.12 ±0.17、315.25±40.94、96.86±9.85)比较,HIF-1 α-siRNA能降低增殖、侵袭及迁移细胞数(0.63 ±0.0
作者:刘廷江;杨涛;孙福振;刘学军
来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 2期