目的:探讨佛甲草提取物对肾母细胞瘤细胞的生物学行为的影响及其作用机制。方法:不同浓度的佛甲草提取物作用于肾母细胞瘤细胞(美国典型菌种保藏中心)后,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中细胞核增殖抗原(Ki-67)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-183表达。转染miR-183抑制剂至肾母细胞瘤细胞下调miR-183表达后,检测细胞周期、迁移和侵袭及Ki-67、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达改变。双荧光素酶报告基因验证miR-183与第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)调控关系。多组间比较采用单因素方差分析(SNK-
q检验)。
结果:佛甲草提取物作用细胞后细胞周期G
0~G
1期增加(
F=171.952,
P<0.05),S期缩短(
F=229.976,
P<0.05),细胞迁移和侵袭数显著减少(
F=229.976、414.157,
P<0.05),细胞中miR-183表达显著降低(
F=524.898,
P<0.05),Ki-67和N-cadherin的蛋白表达显著降低(
F=489.091、314.763,
P<0.05),E-cadherin的蛋白表达显著升高(
作者:徐浩伦;李爽;李刚;王军;陈海涛
来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 5期