目的 观察神经轴突导向分子Slit3及其受体Robo在小鼠主动脉平滑肌细胞(MASMC)中的表达,并探讨外源性Slit3蛋白对MASMC增殖和迁移的作用.方法 体外原代培养并采用免疫荧光法鉴定MASMC,采用逆转录-聚合酶链反应和免疫细胞化学法检测Slit3/Robo信号通路在MASMC的表达情况.将细胞分为6组:阴性对照组(DMEM培养基中含牛血清白蛋白86 μg/L)、Slit3 0μg/L组(DMEM培养基中无Slit3)、Slit3 24 μg/L组(DMEM培养基中含Slit3 24 μg/L)、Slit3 40 μg/L组(DMEM培养基中含Slit3 40 μg/L)、Slit3 80μg/L组(DMEM培养基中含Slit3 80μg/L)和阳性对照组(DMEM培养基中含血小板源性生长因子10 μg/L).采用CCK-8法分析Slit3对MASMC增殖的作用,采用细胞划痕法和Transwell小室检测Slit3对MASMC迁移的作用.结果 (1) MASMC上有Slit2、Slit3、Robo1、Robo4 mRNA及蛋白的表达,Slit2的mRNA表达水平低于Slit3(P<0.05),受体Robo1与Robo4的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05).(2) Slit3 24 μg/L组、Slit3 40 μg/L组、Slit3 80μg/L组的MASMC增殖活性均高于阴性对照组(分别为1.13±0.04、1.19±0.02、1.18 ±0.08和0.64±0.10,P均<0.05),Slit3 40 μg/L组的MASMC增殖活性与阳性对照组(1.27 ±0.05)比较差异无统计学意义(P>0
作者:倪伟;刘涛;王浩宇;刘丽华;陈桂秀
来源:中华心血管病杂志 2016 年 44卷 6期