目的 探讨先天性房室间隔缺损患者CRELD1基因的突变及其功能意义.方法 应用PCR法扩增66例房室间隔缺损患者CRELD1基因的全部11个外显子及两侧各50个碱基以上的序列并进行DNA测序.构建含有突变位点的真核表达载体pcDNA3.1-CRELD1.采用Western印迹及实时荧光定量逆转录-PCR检测CRELD1、Tenascin-C和Aggrecan的蛋白及mRNA表达水平.结果 1例部分性房室间隔缺损患者C857G碱基变化,使位于第8外显子上第一钙结合EGF区域286位点精氨酸被脯氨酸替代(P286R).Western印迹和实时荧光定量逆转录-PCR检测结果显示,CRELD1基因P286R突变后表达增强.与空载对照相比,野生型和突变型Aggrecan的mRNA表达均下调(t值分别为140.27,26.36,P＜0.01),但突变型与野生型之间的Aggrecan表达差异存在统计学意义,突变型下调更为明显(t=-25.69,P=0.002).Tenascin-C在野生型和空载组的表达差异无统计学意义(t=1.167,P＞0.05),但突变型的Tenascin-C表达明显增强(t=6.66,P=0.022).结论 CRELD1基因错义突变是房室间隔缺损发病的高风险易感因素.P286R突变可使基因功能增强,并影响细胞外基质蛋白Aggrecan和Tenascin-C的表达水平,与房室间隔缺陷发病有密切关系.
作者：郭颖；沈捷；李奋；王剑；汪希珂；郭爱华；孙锟
来源：中华医学遗传学杂志 2014 年 31卷 3期
