目的 设计结核分枝杆菌高特异性分子信标探针及优化TB-MB-PCR体系,尝试运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号.方法 运用软件Beacon designer设计分子信标探针,优化TB-MB-PCR反应体系各组份浓度,运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号.结果 优化后的MgC12、引物、dNTP以及MB在PCR反应体系中的最佳终浓度分别为4 mmol/L、0.04μmol/L、0.2 mmol/L以及0.04～0.05/μmol/L;3种稀释标本TB-MB-PCR阳性产物、TB-MB-PCR阴性产物;TB-PCR阴性产物(空白对照)的荧光信号差异明显.结论 高特异性分子信标探针设计较理想、优化后的TB-MB-PCR反应体系灵敏性、特异性好;荧光分光光度仪可直接检测反应产物,有简单、灵敏、准确等优点.
作者：陈庆海；边志衡；张雪；匡红；敖琳；府伟灵
来源：中华医院感染学杂志 2008 年 18卷 3期
