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目的:探讨miRNA-373-3p(miR-373-3p)靶向调控CD44表达对肾母细胞瘤G401细胞增殖的影响。方法:利用生物信息学方法,基于miRDB、miRanda、PITA以及DIANA-microT生物信息学数据库预测miR-373-3p可能的靶基因。取G401细胞,分别转染miR-373-3p模拟物、模拟物阴性对照、miR-373-3p抑制剂、抑制剂阴性对照,采用CCK-8法检测细胞增殖能力;采用克隆形成实验检测克隆形成的数目;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CD44 mRNA的相对表达量;蛋白质印迹法检测CD44蛋白的表达水平。利用HEK-293T细胞进行双荧光素酶报告基因实验验证miR-373-3p靶基因。结果:生物信息学分析结果提示CD44是miR-373-3p的靶基因。自转染24 h起,miR-373-3p模拟物组G401细胞增殖能力较模拟物阴性对照组均下降(均 P<0.05);自转染48 h起,miR-373-3p抑制剂组细胞增殖能力较抑制剂阴性对照组均增强(均 P <0.05)。miR-373-3p模拟物组克隆形成数少于模拟物阴性对照组[(55.3±2.5)个比(90.7±2.9)个],差异有统计学意义( t=14.57, P<0.01);miR-373-3p抑制剂组克隆形成数多于抑制剂阴性对照组[(115.0±2.7)个比(92.0±2.4)个],差异有统计学意义( t=8.86, P<0.01)。双荧光

作者:王艳君;孔艳霞;全雪丽;原艳丽;段勇涛;王风;王洁

来源:肿瘤研究与临床 2022 年 34卷 2期

知识库介绍

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作者:
王艳君;孔艳霞;全雪丽;原艳丽;段勇涛;王风;王洁
来源:
肿瘤研究与临床 2022 年 34卷 2期
标签:
Wilms瘤 微RNAs 抗原,CD44 细胞增殖 Wilms tumor MicroRNAs Antigens, CD44 Cell proliferation
目的:探讨miRNA-373-3p(miR-373-3p)靶向调控CD44表达对肾母细胞瘤G401细胞增殖的影响。方法:利用生物信息学方法,基于miRDB、miRanda、PITA以及DIANA-microT生物信息学数据库预测miR-373-3p可能的靶基因。取G401细胞,分别转染miR-373-3p模拟物、模拟物阴性对照、miR-373-3p抑制剂、抑制剂阴性对照,采用CCK-8法检测细胞增殖能力;采用克隆形成实验检测克隆形成的数目;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CD44 mRNA的相对表达量;蛋白质印迹法检测CD44蛋白的表达水平。利用HEK-293T细胞进行双荧光素酶报告基因实验验证miR-373-3p靶基因。结果:生物信息学分析结果提示CD44是miR-373-3p的靶基因。自转染24 h起,miR-373-3p模拟物组G401细胞增殖能力较模拟物阴性对照组均下降(均 P<0.05);自转染48 h起,miR-373-3p抑制剂组细胞增殖能力较抑制剂阴性对照组均增强(均 P <0.05)。miR-373-3p模拟物组克隆形成数少于模拟物阴性对照组[(55.3±2.5)个比(90.7±2.9)个],差异有统计学意义( t=14.57, P<0.01);miR-373-3p抑制剂组克隆形成数多于抑制剂阴性对照组[(115.0±2.7)个比(92.0±2.4)个],差异有统计学意义( t=8.86, P<0.01)。双荧光