目的 探讨野黄芩苷对苯并芘(benzo[a]pyrene, B(a)P)诱导的DNA损伤的保护作用.方法 ① 采用稳定转染抑癌基因p53-GFP质粒的p53 -/ -MEF细胞(p53-GFP细胞)筛选野黄芩苷等小分子化合物对p53启动子的激活情况;② 将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,用Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达情况.③ 将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中凋亡相关蛋白PARP的变化.结果 荧光结果显示,10 μmol/L的B(a)P能够明显激活p53-GFP荧光,其中野黄芩苷和B(a)P共处理后荧光表达被明显抑制;用Western印迹检测发现,与DMSO对照组相比,B(a)P处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达增加, PARP的切割增强,而野黄芩苷和B(a)P共处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX蛋白表达水平较B(a)P处理组明显降低,同时PARP的切割明显减弱,并且具有浓度依赖性.结论 本研究采用稳定转染p53-GFP质粒的p53 -/ -MEF细胞初步观察到野黄芩苷可能对苯并芘诱导的DNA损伤具有保护作用.在MRC-5细胞中的进一步研究证明,野黄芩苷与 B(a)P 共处理能降低 MRC-5中 p-p53(Ser15)和γH2AX的表达水平,同时能降低凋亡相关
作者:高茜;刘丹;彭雷;刘静;罗瑛;夭建华;张继虹
来源:医学分子生物学杂志 2018 年 15卷 1期