以野生型大肠杆菌E.coli Ⅱ为宿主细胞,转化带有编码谷胱甘肽合成酶系的基因gsh Ⅰ和gshⅡ的质粒pGH501,获得了一株谷胱甘肽合成活性、质粒稳定性和传代稳定性俱佳,并且能够重复使用的重组大肠杆菌E.coliⅡ-1.该菌株经过甲苯处理后,能够在胞外积累4g/L左右的谷胱甘肽(GSH).在合成反应体系中,提高L-谷氨酸浓度可促进GSH合成,但L-半胱氨酸浓度增大到20mmol/L后会抑制GSH的合成.根据GSH合成反应中能量辅因子的变化情况,提出E.coliⅡ-1细胞控制的GSH合成反应机理:由谷胱甘肽合成酶(GSH-Ⅱ)控制的第二步反应的能量供体是ADP而非ATP,该反应是整个GSH合成反应的限速步骤,高浓度ADP可能会抑制GSH-Ⅱ的活性.在GSH合成反应体系中添加100mmol/L的L-丝氨酸-硼酸钾混合物,可以有效地防止GSH的进一步降解,反应3 h后,GSH产量达到23.0mmol/L(约7.1g/L).
作者：李华钟；李寅；林金萍；陈坚
来源：微生物学报 2001 年 41卷 1期
