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利用重组大肠杆菌Ⅱ-1中的谷胱甘肽合成酶系和面包酵母WSH-J7中的ATP生物合成酶系,构建了一个以葡萄糖为能源的种间耦合ATP再生系统.经过通透性处理的酵母细胞几乎不能消耗葡萄糖.在反应体系中添加1mmol/L AMP和0.05 mmol/L NADH,即可启动酵母的酵解途径.提高耦合系统中的葡萄糖浓度,可促进GSH的合成.当葡萄糖浓度为400mmo1/L时,系统内GSH浓度达到10.4mmol/L(3.2g/L).Mg+缺乏时,耦合系统和外加ATP的非耦合系统均不能合成谷胱甘肽.耦合系统中Mg+与ATP形成螯合物,可能是导致耦合系统中GSH产量较低的原因.在耦合系统中补加Mg2+,反应6h时GSH浓度达到14.3mmol/L(4.4g/L).

作者:李寅;李华钟;林金萍;陈坚

来源:微生物学报 2001 年 41卷 2期

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李寅;李华钟;林金萍;陈坚
来源:
微生物学报 2001 年 41卷 2期
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重组大肠杆菌 面包酵母 种间耦合ATP再生系统 谷胱甘肽 生物合成 构建
利用重组大肠杆菌Ⅱ-1中的谷胱甘肽合成酶系和面包酵母WSH-J7中的ATP生物合成酶系,构建了一个以葡萄糖为能源的种间耦合ATP再生系统.经过通透性处理的酵母细胞几乎不能消耗葡萄糖.在反应体系中添加1mmol/L AMP和0.05 mmol/L NADH,即可启动酵母的酵解途径.提高耦合系统中的葡萄糖浓度,可促进GSH的合成.当葡萄糖浓度为400mmo1/L时,系统内GSH浓度达到10.4mmol/L(3.2g/L).Mg+缺乏时,耦合系统和外加ATP的非耦合系统均不能合成谷胱甘肽.耦合系统中Mg+与ATP形成螯合物,可能是导致耦合系统中GSH产量较低的原因.在耦合系统中补加Mg2+,反应6h时GSH浓度达到14.3mmol/L(4.4g/L).