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目的 探究来氟米特(leflunomide,LEF)通过调节微小RNA(microRNA,miR)-449a在肺纤维化中的机制研究.方法 将人肺成纤维细胞MRC-5分为6组,即对照组、LEF组、LEF+mimic组、mimic组、LEF+inhibitor组和inhibitor组.通过质粒转染miR-449a mimic或inhibitor来过表达或沉默miR-449a,在5 mg/L LEF的条件下培养48 h.分别通过CCK-8法、克隆形成实验和流式细胞术检测各组细胞活力、细胞增殖能力和凋亡率.使用免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)胶质蛋白I(collagen I,col I).分别使用qPCR和Western blot检测miRNA和蛋白的水平.结果 mimic组miR-449a水平显著高于对照组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的miR-449a水平显著低于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的miR-449a的表达水平显著高于LEF组,LEF+inhibitor组的miR-449a水平显著低于LEF组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的细胞活力和细胞增殖能力显著高于对照组(P<0.05).mimic组的细胞活力和细胞增殖能力显著低于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的细胞活力和细胞增殖能力显著低于LEF组而LEF+inhibitor组的细胞活力显著高于LEF组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的细胞凋亡率低于对照组(P<0.05),mimic组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的细

作者:刘冬;赖伟男

来源:药学实践杂志 2020 年 38卷 4期

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作者:
刘冬;赖伟男
来源:
药学实践杂志 2020 年 38卷 4期
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来氟米特 肺纤维化 成纤维细胞 α平滑肌肌动蛋白 微小RNA-449a c-Jun氨基末端激酶
目的 探究来氟米特(leflunomide,LEF)通过调节微小RNA(microRNA,miR)-449a在肺纤维化中的机制研究.方法 将人肺成纤维细胞MRC-5分为6组,即对照组、LEF组、LEF+mimic组、mimic组、LEF+inhibitor组和inhibitor组.通过质粒转染miR-449a mimic或inhibitor来过表达或沉默miR-449a,在5 mg/L LEF的条件下培养48 h.分别通过CCK-8法、克隆形成实验和流式细胞术检测各组细胞活力、细胞增殖能力和凋亡率.使用免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)胶质蛋白I(collagen I,col I).分别使用qPCR和Western blot检测miRNA和蛋白的水平.结果 mimic组miR-449a水平显著高于对照组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的miR-449a水平显著低于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的miR-449a的表达水平显著高于LEF组,LEF+inhibitor组的miR-449a水平显著低于LEF组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的细胞活力和细胞增殖能力显著高于对照组(P<0.05).mimic组的细胞活力和细胞增殖能力显著低于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的细胞活力和细胞增殖能力显著低于LEF组而LEF+inhibitor组的细胞活力显著高于LEF组(P<0.05).LEF组和inhibitor组的细胞凋亡率低于对照组(P<0.05),mimic组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).LEF+mimic组的细