目的:探讨热休克蛋白(HSP)是否参与PI3K/Akt信号通路介导的H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.方法:利用PC12细胞建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞凋亡的实验模型,分组如下:(1)空白对照组;(2) 损伤组;(3)预处理+损伤组;(4)LY294002+预处理+损伤组;(5) LY294002组;(6) quercetin+预处理+损伤组;(7) 17-AAG+预处理+损伤组;(8) 溶剂对照组.应用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定caspase-3的活性,免疫印迹法(Western blotting)测定HSP的表达水平.结果:100 μmol/L H2O2预处理PC12细胞90 min可显著地抑制300 μmol/L H2O2引起的细胞凋亡,使caspase-3的活性降低,同时上调HSP70和HSP90的表达.HSP70和HSP90的抑制剂quercetin和17-AAG拮抗H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.PI3K抑制剂LY294002不仅拮抗了H2O2预处理抗细胞凋亡的作用,并且抑制H2O2预处理对HSP70和HSP90的表达上调.结论:PI3K/Akt通路、HSP70和HSP90均参与H2O2预处理诱导的细胞保护作用.并且HSP70和HSP90参与PI3K/Akt信号通路介导H2O2预处理的抗细胞凋亡作用.
作者：张梅；李卫；郭瑞鲜；罗健东；冯鉴强
来源：中国病理生理杂志 2011 年 27卷 8期
