目的构建、克隆人乳头瘤病毒11型(HPV11)E6蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定.方法用PCR法,从尖锐湿疣(CA)标本中扩增出HPV 11型E6蛋白基因,与pET32a载体连接成重组表达质粒pET32a/E6;重组质粒转入BL21大肠杆菌,经诱导表达硫氧还蛋白E6融合蛋白(Trx-E6); 该蛋白经3S NTA Resin纯化柱纯化,SDS-PAGE和Western Blotting检测鉴定.结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pET32a/E6成功构建,诱导后高表达Trx-E6融合蛋白,Western Blotting鉴定证实表达蛋白分子量为36 000D的Trx-E6融合蛋白.结论获得高表达、高纯度的HPV11 E6蛋白, 为该蛋白的功能及免疫学分析及CA的疫苗研究打下了基础.
作者：王飞；毕志刚；李光富；王群；王新军；刘丰；张兆松
来源：中国皮肤性病学杂志 2004 年 18卷 5期
