目的：表达并纯化ESAT6c2融合蛋白，并对融合蛋白免疫原性进行鉴定，以用作结核菌特异性IFN-γElispot试剂盒的特异性抗原。方法全基因合成ESAT6目的基因，利用BamHⅠ和BglⅡ同尾酶串联目的基因，构建ESAT6c2-pET25b重组质粒，转化E.coli，诱导表达。Ni柱亲和纯化融合蛋白，测定浓度后应用到T.SPOT-TB试剂盒（Oxford）检测临床样本进行免疫原性研究。结果成功构建了ESAT6串联表达重组质粒，制备出高纯度的ESAT6c2融合蛋白。临床样本检测结果表明ESAT6c2融合蛋白作为刺激源，与临床诊断相比特异性为100
作者：刘晓磊；张慧丽；李峰；王战争；韩静；杨艳坤；高岭
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2015 年 6期
