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目的 探讨长链非编码RNA IGKV5对乳腺癌MCF-7细胞迁移侵袭的影响并预测可能机制.方法 通过慢病毒转染技术在MCF-7细胞中分别转染IGKV5过表达载体(过表达组)和空载体(阴性对照组)并设未行转染的空白对照组.采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测IGKV5过表达效率,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭情况,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的蛋白水平,荧光原位杂交检测IGKV5的定位情况,高通量测序筛选IGKV5过表达后的差异基因,GO和KEGG分析差异基因参与的生物学过程和信号通路情况.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,过表达组MCF-7细胞的IGKV5水平升高,迁移侵袭能力减弱且MMP-2和MMP-9水平降低(P<0.05).IGKV5主要集中在细胞核中.高通量测序结果表明,IGKV5过表达后有254个差异表达基因,其中96个基因上调和158个基因下调,进一步功能分析发现,这些差异基因涉及的生物学过程主要与丙三醇分解代谢过程、甾醇生物合成和甘油激酶活性等有关,通路主要与甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢及代谢通路等相关.筛选的差异基因HMGCS1、GK、ACSL1和MSMO1在IGKV5过表达后均呈现不同程度的减弱.结论 IGKV5可能改变下游基因的表达水平并通过影响脂代谢的方式来减弱乳腺癌细胞的迁移侵袭能力.IGKV5有望成为治疗乳

作者:彭劲晖;裴生斌;付洪涛;谢晖;王水

来源:临床肿瘤学杂志 2021 年 26卷 4期

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作者:
彭劲晖;裴生斌;付洪涛;谢晖;王水
来源:
临床肿瘤学杂志 2021 年 26卷 4期
标签:
乳腺癌 长链非编码RNA IGKV5 迁移侵袭 脂代谢
目的 探讨长链非编码RNA IGKV5对乳腺癌MCF-7细胞迁移侵袭的影响并预测可能机制.方法 通过慢病毒转染技术在MCF-7细胞中分别转染IGKV5过表达载体(过表达组)和空载体(阴性对照组)并设未行转染的空白对照组.采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测IGKV5过表达效率,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭情况,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的蛋白水平,荧光原位杂交检测IGKV5的定位情况,高通量测序筛选IGKV5过表达后的差异基因,GO和KEGG分析差异基因参与的生物学过程和信号通路情况.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,过表达组MCF-7细胞的IGKV5水平升高,迁移侵袭能力减弱且MMP-2和MMP-9水平降低(P<0.05).IGKV5主要集中在细胞核中.高通量测序结果表明,IGKV5过表达后有254个差异表达基因,其中96个基因上调和158个基因下调,进一步功能分析发现,这些差异基因涉及的生物学过程主要与丙三醇分解代谢过程、甾醇生物合成和甘油激酶活性等有关,通路主要与甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢及代谢通路等相关.筛选的差异基因HMGCS1、GK、ACSL1和MSMO1在IGKV5过表达后均呈现不同程度的减弱.结论 IGKV5可能改变下游基因的表达水平并通过影响脂代谢的方式来减弱乳腺癌细胞的迁移侵袭能力.IGKV5有望成为治疗乳