目的:研究microRNA-1 5a(miR-15a)在多发性骨髓瘤(MM)细胞生长中的作用及可能机制.方法:慢病毒颗粒感染MM细胞株U266和RPMI8226,流式细胞术(FCM)分选获得稳定转染MM细胞株.CCK-8法检测miR-15a高表达前后MM细胞的增殖情况;AO/EB染色、Hoechst 33258荧光染色法及FCM检测miR-15a高表达前后MM细胞凋亡的情况;FCM检测miR-15a高表达前后MM细胞周期的情况;real-time PCR方法检测miR-15a高表达前后MM细胞miR-15a、BMI-1及BCL-2 mRNA的表达;Western blot方法检测miR-15a高表达前后MM细胞BMI-1蛋白表达.结果:获得高表达miR-15a的MM稳定转染细胞株.CCK-8结果显示miR-15a高表达可抑制MM细胞(U266和RPMI8226)的增殖;AO/EB、Hoechst 33258染色和FCM结果显示,miR-15a高表达可显著诱导MM细胞(U266和RPMI8226)的凋亡,U266和RPMI8226细胞高表达组与对照组细胞凋亡率分别为:90.52% vs37.08%,59.40% vs 44.17%;同时,miR-15a高表达可诱导MM细胞(U266和RPMI8226)G1期阻滞,G1期细胞分别为(41.50 ±0.64)%、(45.31±0.77)%.real-time PCR结果显示,在高表达miR-15a抑制骨髓瘤细胞生长的过程中BCL-2 mRNA表达显著降低,BMI-1 mRNA表达则没有改变,但是Western blot结果却显示BMI-1蛋白表达出现显著降低.结论:miR-15a高表达通过
作者:赵凯;战榕;吴顺泉;黄豪博;徐珍珍;牛文艳
来源:中国实验血液学杂志 2015 年 23卷 3期