目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达.方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆入pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+)-ESAT6重组体.结果:重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经IPTG诱导,pQE30-ESAT6未表达目的蛋白,而pET32a(+)-ESAT6表达出19kDa 左右重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h重组蛋白表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中,表达量占全菌蛋白质的42
作者：陈全；骆旭东；蒋英；江山；朱道银
来源：重庆医科大学学报 2003 年 28卷 1期
