目的利用分泌具有GPX活性的单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞3G5,克隆其mAb体的可变区基因.方法提取杂交瘤细胞的总RNA,分离mRNA,反转录合成cDNA.经PCR扩增VH基因和VL基因,将VH基因和VL基因与载体pGEM-T连接后,进行酶切鉴定和序列分析.结果构建了2个分别含有VH和VL基因的重组质粒.序列分析表明,VH和VL分别属于ousc heavy chain subgroupIII和mouse light chain subgroupV亚群,长度为372和324bp,编码124和108个氨基酸,在高变区分别有4和2个丝氨酸.结论克隆的VH和VL基因符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征,为将来制备具有GPX活性的单链抗体提供了可靠的基因材料.
作者：吴广谋；冯书章；刘子；张国利；郭学军；罗贵民；高姝娟
来源：细胞与分子免疫学杂志 2000 年 16卷 2期
